DSM Pentapharm

Pentapharm사는 스위스에 위치한 회사로서 1948년에 창업한 73년의 역사를 가지고 있는 회사입니다.

제약,진단,화장품 원료/ 진단키트/ 시약등을 제조 공급합니다. 영양,화학,환경분야에서 유명한 네덜란드의 다국적기업 DSM의 일원이기도 합니다.

Pentapharm사는 여러 사업분야중 특히, 뱀독(Snake Venom)에서 추출한 효소 분야에서 높은 경쟁력을 가지고 있는 회사입니다.

브라질에 세계 최대규모의 독사 농장을 운영하고 있습니다. 순도 높게 정제된 다양한 뱀독은 화장품, 의약품, 진단키트 제조에 활용됩니다.

지혈, 혈전 관련한 의약품, 진단시장에 기여하고 있습니다.

Pentapharm의 주요 취급품목

• - Specific Coagulation Peptide Substrates
• - Biochemicals
• - Protease inhibitors
• - Diagnostic kits & Reagents
• - Snake Venom Enzymes

혈관이 손상되어 출혈이 생기면 출혈을 멈추기 위해 우리 몸은 다양한 방어기작을 가동시킵니다. 그 예로 혈관수축과 지혈과정 등이 연쇄적으로 진행됩니다. Pentapharm사는 지혈 진단에 사용되는 chromgenic peptide substrate인 Pefachrome®과 Pefafluor®를 취급합니다.

Pentapharm사에서는 취급하는 chromogenic peptide들은 합성된 제품으로 serine proteinase 활성도를 측정하는데 사용되며, 빠르고 정확한 분석과 색상의 변화를 육안으로 모니터링을 하실 수 있습니다.

Chromogenic substrate는 가장 일반적으로 사용하는 405 nm를 흡수하는 p-nitroaniline(pNA)과 342 nm 파장을 흡수하고 440 nm 파장을 방출하는 Fluorogenic 7-amino-4-methylcoumarine(AMC)으로 구성되어 있습니다.

• 그림설명. Chromogenic substrate의 모식도
• PG=protecting group, AA=amino acids, pNA=p-nitroaniline

Pefachrome®: Chromogenic Substrates

아래와 같은 혈액 응고 과정에 관여하는 다양한 serine proteases의 활성을 측정하는데 사용하는 chromogenic peptide 기질:

• - Coagulation
• - Fibrinolysis
• - Kallikein-kinin system
• - Complement system

이러한 chromogenic peptide들은 또한 제약 산업이나 다른 제품 생산과정의 품질 관리에 활용되기도 합니다.

Pefafluor®: Fluorogenic Substrates

Pefafluor는 fluorogenic peptide substrate로서 연구, 제조 및 품질관리 등에 사용하실 수 있습니다. 이 기질의 fluorogenic 작용기는 AMC (7-amino-4-methylcoumarin)로, AMC의 광학 특성은 다음과 같습니다.

• - 최대흡수파장: approx. 342 nm
• - 최대방출파장: approx. 440 nm

▶ Pefafluor® TH is a specific synthetic fluorogenic peptide substrate for the measurement of Thrombin activity. Z-Gly-Gly-Arg-AMC·HCl

▶ Pefafluor® FIXa is a specific synthetic fluorogenic peptide substrate for the measurement of Factor IXa activity. CH3SO2-D-CHG-Gly-Arg-AMC·AcOH

Pentapharm manufactures selected standardized biochemical products for:

• • Research
• • Production
• • In-process control
• • Quality control
• • Analytical applications
• • Purification processes
• Prionex
• ®

화학적 특성과 표준화된 품질 측면에서 Prionex®는 우수한 BSA 대체제로, 불활성 단백질 안정제 및 세포 배양 배지의 첨가제로 사용될 수 있습니다.

Prionex®는 단백질을 안정화 시키는데 뛰어난 효능을 보이며, porcine 에서 추출한 고순도의 진피 콜라겐 폴리펩타이드가 10% 포함된 수용액입니다. Prionex®은 부분 가수분해로 만들며, 최종 멸균과정을 거쳐 생산됩니다. 연골, 뼈, 혈장 성분이 없으며 부분 가수분해된 젤라틴 A 타입입니다.

Prionex®은 porcine에서 추출한 collagen peptide fraction으로, 아래와 같은 장점을 가집니다.

• - Optimizes stability of biological activity
• - Improves conditions for lyophilisation and heat treatment
• - Avoids denaturation by chaotropic agents or solvents
• - Extends shelf life for enzymes and proteins
• - High consistency stabilizer
• - Non-toxic and non-antigenic
• - Free from nucleic acids, polysaccharides and lipids
• - Free from any additives
• MW

Prionex®의 분자량은 평균 20 KDa 정도로, gel permeation chromatography 방법에 의해 측정된 것입니다.

• Solubility

Prionex®은 물, 희석된 전해질 용액, 글리세롤 및 DMSO에 잘 녹을 뿐만 아니라, 희석된 에탄올, 황산 암모늄 용액 20% 포화도 이하에서 잘 용해됩니다. 보관은 15-25℃ 온도에서 빛이 차단되는 곳에 보관합니다.

• Rabbit brain cephalin

Rabbit brain cephalin은 토끼 뇌에서 분리한 phospholipids로 구성되었습니다. Phospholipid dependent coagulation assay에서 phospholipid source로 사용됩니다.

• - Phosphatidylserine
• - Phosphatidylethanolamine
• - Phosphatidylethanolcholine

Pentapharm사에서는 다양한 반응을 저해하는 저해제를 취급합니다. 대표적인 저해제로는 Serine proteinase 저해제, fibrin 중합체 형성 저해제 및 Thrombin 저해제 등이 있습니다. Pentapharm사에서 취급하는 제품을 살펴보면, Serine Proteinase의 저해제로 Aprotinin과 Pefabloc® SC가 있으며, fibrin의 중합체 형성을 저해하는 저해제로 Pefabloc® FG, Thrombin 저해제로 r-Hirudin EC 등이 있습니다.

• Serine Protease 저해제

Serine proteinase의 저해제인 Aprotinin은 용액과 분말형태로 제공되며 serine proteinase를 가역적으로 저해합니다. Aprotinin은 58개의 아미노산으로 구성된 폴리펩타이드이며, 4개의 lysine 그룹에 의해 형성된 active center가 3차구조의 serine proteinase에 결합하여 효소의 활성을 저해합니다.

• Fibrin Polymerization 저해제

Pefabloc® FG는 피브리노겐에 높은 친화력으로 결합하여, 피브린의 중합을 저해합니다. Pefabloc® FG는 피브리노겐이 포함된 반응 혼합물에 첨가제로 사용됩니다. 즉, 진단 및 생성 과정(예. 혈장에서 트롬빈의 생성을 측정)에서 발생할 수 있는 피브린에 의한 혼탁 우려, 겔 형성 및 피브린 침적등을 차단시켜 줍니다. Pefabloc® FG는 또한 혈액응고 인자 및 기타 혈장 단백질의 정제 및 처리 과정에서 피브린 형성을 억제하는데 사용됩니다.

• Thrombin 저해제

Benzamidine 구조는 트립신 유사 효소를 저해하는 저해제 개발에 있어 중요한 구조입니다. 이것은 trypsin-like enzyme에 의해 가수분해되는 염기성 아미노산 Arg과 lys의 양성자화된 side chain을 본딴 것입니다. Pefabloc® TH (α-NAPAP)는 트롬빈의 가장 강력하고 선택적인 경쟁적 저해제 중 하나입니다. Pefabloc® TH (α-NAPAP)는 진단 시스템이나, 분석, 연구용 및 산업용 정제과정 중에 원치않는 트롬빈의 활성을 저해하기 위한 목적으로 사용하실 수 있습니다. Hirudin은 가장 강력한 트롬빈의 저해제로 알려져 있습니다. Hirudin의 완전한 구조가 [Dodt et al., 1984] 밝혀졌고, hirudin의 코딩 유전자가 합성되어 yeast [Meyhack et al., 1987]와 다른 미생물에서 발현되었습니다. Pentapharm에서 제공하는 r-hirudine EC는 트롬빈에 의한 반응을 저해하는데 사용됩니다. r-Hirudin을 시험 혼합물에 첨가하여 프로트롬빈 또는 프로트롬빈 활성제를 사용한 시약의 오염 때문에 발생하는 트롬빈 작용을 배제시킬 수 있습니다.

Pentapharm사는 자체 독사 농장을 운영하고 있으며, 고순도로 정제된 뱀독에서 추출한 다양한 효소를 취급하고 있습니다.

Pentapharm사에서 생산하는 고순도의 뱀독 추출효소는 혈장응고 및 섬유소 분해 시스템의 특정 구성성분을 활성화시키거나 비활성화시키는데 관여합니다. 분리된 뱀독 단백질은 응고 및 혈소판 응집 테스트, 면역시스템과 같은 photometric assay에 활용됩니다.

Snake Venom Enzyme; Batroxobin

Batroxobin은 Batrops atrox Maranhoa의 독에서 추출한 트롬빈-유사 단백질 가수분해 효소입니다. 이것은 피브린의 Aα 사슬에서 16번 Arg과 17번 Gly 결합을 절단하여 fibrinopeptide A를 방출하여 피브린 I 단량체나 Des-AA 단량체를 형성합니다. 이렇게 형성된 단량체는 fibrin I 으로 자발적으로 응집합니다. Batroxobin은 또한 내피세포에서 tPA의 방출을 유도합니다.

피브리노겐에 특이적으로 작용하며, 혈소판의 본래의 기능에 영향을 주지 않으면서 혈소판이 풍부한 혈장을 응고시키는 능력과 트롬빈 저해제에 대해 반응하지 않기에 batroxobin은 혈액 응고 연구 및 진단 연구등에 활용되고 있습니다. Batroxobin은 혈장에서 피브리노겐을 확인하고 혈장 내 응고시간(Reptilase time)을 측정하는데 사용될 수 있습니다. 또한 혈전용해치료를 받는 환자(dysfibrinogenemia)를 검사하거나 혈소판 수축 시스템을 테스트 하는데 사용합니다.

• Batroxobin maranhao - For the determination of fibrinogen
• Protac - Fast acting protein C activator

Ecarin - For the determination of prothrombin and hirudin, specifically activates prothrombin via meizothrombine

Convulxin - For activation of human platelets via GPVI-receptor, studies on platelets receptors

• RVV-Factor V Activator - For activation and determination of Factor V

RVV-Factor X Activator - For the determination of Factor and for screening of Lupus Anticoagulants

Pentapharm사는 지혈진단을 위한 다양한 biochemicals, protease inhibitors, specific coagulation peptide substrates, diagnostic kits, venomes enzymes 등을 취급합니다.

Pentapharm사의 혈액응고 및 용해과정의 이상 유무를 진단하는 키트는 다음과 같습니다.

• ◎ Pentapharm Pefakit® APC-R Factor V Leiden
• : 혈장 기반으로 활성화 C 단백질 저항성 분석

- 트롬빈에 의해 활성화 C 단백질(Activated protein C, APC)로 활성화되어 응고인자 FVa와 FVIIIa를 불활성화시켜 응고과정을 저해

- APC가 있음에도 항응고과정이 일어나지 않는 현상을 APC 내성이라하며, 유전성 혈전증의 중요 원인으로 밝혀짐. 이때 응고인자 V 돌연변이인 Factor V Leiden이 작용

• - 응고인자 Va가 분해되지 않고 축적되어 혈액응고가 촉진됨
• - APC 내성 유무를 진단함으로 혈전증 발생의 위험을 예방
• ◎ Pentapharm Pefakit® APC-R Factor V Leiden Controls
• :

Factor V Leiden mutation으로 인한 활성화 C 단백질 내성에 대한 기능적 표현형을 결정하는 분석법에서 Factor V Leiden 돌연변이(FV:Q)를 확인하기 위한 대조 혈장

Pefaclot™ UFH

• : 혈장 기반의 UFH(Unfractionated heparin) 검출

Pefakit® Reptilase® Time

• : 혈액응고의 마지막 단계를 진단하는데 사용

- 트롬빈과 유사한 reptilase를 사용하기 때문에, 헤파린에 영향을 받지 않아 헤파린이 있는 상태에서도 피브린 중합체 형성의 이상 유무를 검출합니다.

Pefakit® TAFI

: 혈장 기반의 발색 분석으로 Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor(TAFI) 활성도 측정

• ※ Pentapharm products in the coagulation cascade